点击图片查看原图
基于Edman降解的蛋白N端序列分析检测技术服务详情介绍
表达纯化后的蛋白产物，特别是蛋白品的分析过程中，需要对蛋白的末端进行验证，以保证表达纯化产物的N端和C端序列准确。Edman降解法是蛋白的N端序列分析中非常成熟的方法之一，有着广泛的应用。百泰派克公司采用岛津公司Edman测序系统，为广大科研工作者和科研客户提供纯化后蛋白产物、抗体以及蛋白疫苗的N端测序服务。采用我们的测序系统，可以测定N端30个氨j酸的序列信息。采用特定的蛋白上样系统，可以测定N端的60-70个氨j酸。百泰派克公司也建立了以优良的LC-MS/MS技术进行N-端测序的平台，可以测出封闭和修饰的蛋白质末端，与Edman降解法形成互补，保证N端测序服务的顺利进行。 在蛋白质测序前，蛋白样品首先经过SDS-PAGE的分离，保证样品的纯度满足测序的要求；随后将SDS-PAGE上的蛋白样品转移到PVDF膜上；经过染色确定把蛋白t带并切出；使用Edman测序仪对得到的PVDF膜上的蛋白样品进行分析。Edman降解测序是通过循环反应从蛋白质的N端开始逐个鉴定氨j酸的种类，从而对蛋白质的N端序列进行测定。每一个Edman测序反应包括3步：dìyī步是在碱性条件下，PITC与蛋白N端的游离氨j结合；第二步是在酸性溶液中，N端残基被切除；第三步是PITC结合的残基转化成为更为稳定的PTH残基，经过在线的HPLC分析，根据洗脱时间确定氨j酸种类。
应用领域
? 蛋白表达产物的验证：重组蛋白插入位点和表达顺序是否正确； ? 细胞株建立和发酵过程中蛋白产物的验证：验证细胞株建立和发酵过程中蛋白产物N端jiǎliúānsuān和信号肽是否正确处理； ? 蛋白降解/酶切分析：对降解/酶切形成的新蛋白片段N端进行分析，确定断裂/酶切位点； ? De-novo测序：对于蛋白数据库中不存在的全新蛋白序列进行分析。
更多详情请咨询：https://www.chem17.com/st539205/product_39189419.html
百泰 基于Edman降解的蛋白N端序列分析